项目背景

　　放射性肺损伤是胸部恶性肿瘤放疗后常见并发症，主要以肺充血、水肿、肺间质增厚、肺泡间隔进行性纤维化为特征，临床上一般表现为放射性肺炎和肺纤维化两个独立但又紧密联系的过程。放射性肺炎一般发生在胸部照射后12周内，主要表现为肺泡细胞损伤和肺内炎症细胞积聚。放射性肺纤维化一般发生在照射晚期或伴随放射性肺炎同时发生，主要表现为肺内成纤维细胞增殖、胶原聚集、正常肺组织结构破坏，是一个不可逆的病理过程。

　　IL-17A是TH17细胞的标志性细胞因子，IL-17A能在组织局部诱导趋化因子、G-CSF和黏附分子的表达或释放，招募和激活炎症细胞尤其是嗜中性粒细胞，促进中性粒细胞向病灶部位迁移，参与中性粒细胞的增殖、成熟和趋化，协同刺激T细胞的活化，促进树突状细胞的成熟，从而介导炎症，影响感染、肿瘤、自身免疫疾病的病理过程。

　　肺炎期的特征是各种免疫细胞和细胞因子/趋化因子的不断级联，导致肺部出现不同程度的炎症和相应的症状。由于DNA损伤、活性氧诱导和细胞凋亡，导致肺的急性辐射反应。DAMPs的释放和细胞因子和趋化因子的分泌激活免疫系统。在这一阶段，不同的淋巴细胞亚群，如Th1, Th17和潜在的先天淋巴样细胞(ILC)会促进炎症的发生，而淋巴细胞亚群Treg能够控制有害的、过度的促炎反应。在有丝分裂晚期细胞死亡后，缺氧，释放DAMPs，细胞因子和生长因子，在这个阶段淋巴细胞(Th2, Th9, Treg以及潜在的ILC)表现出一种抗炎甚至是促纤维化的表型，诱导肌成纤维细胞的活化和纤维化的发展。

　　在肺炎的早期阶段3至12周，招募的T淋巴细胞分泌T H 1类促炎因子TNF-α，IFN-γ，IL-2吸引并激活更多的免疫细胞到损害部位。除了这一经典的TH1反应外，在小鼠胸廓照射后还观察到TH17的促炎反应。IL-16、IL-17、IL-23和IL-27细胞因子水平在照射后3周开始升高，可能参与了促进炎症和组织损伤的过程^[24]。结果还显示，除了细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α，T H 1细胞和T H 17细胞主要参与了肺炎阶段的促炎反应。

　　IL-17A通过与肺泡上皮细胞表面的相应受体IL-17RA结合，促进了上皮间质转化（EMT）进程及胶原沉积，且这一作用是TGF-β1依赖性的。Ragini Vittal及SuMi等均通过体外实验及动物研究证实，IL-17A促进了体外培养的肺泡上皮细胞向具有间质特征的细胞转变，并以TGF-β依赖性方式启动EMT过程。SuMi等通过对博来霉素诱导的肺纤维化模型研究，首次发现了IL-17A与自噬的关系，揭示了IL-17A通过TGF-β1非依赖途径抑制自噬的发生，阻碍了损伤细胞及异常胶原的降解清除，从而为肺纤维化的发生发展提供了基础。也有学者通过研究提出，肺组织所处的免疫微环境也是决定肺纤维化发生的重要条件。以Th2、Treg型细胞及其分泌因子为主的抑制性免疫微环境有助于肺向纤维化发展；而以Thl型细胞及其因子占主导的刺激性免疫微环境则可有益于肺组织向好的方面转归——炎症消退。

　　项目内容

　　1、构建小鼠放射性肺损伤模型。

　　2、观察照射后不同时间点小鼠肺组织炎性细胞因子的表达情况。

　　3、研究IL-17A中和抗体作用后，不同治疗组小鼠生存情况及不同时间点肺组织的病理组织学变化及胶原沉积情况。

　　4、IL-17A中和抗体作用后，检测肺泡灌洗液及肺组织中IL-17A相关炎性细胞因子的表达。

　　5、IL-17A中和抗体作用后，检测不同时间点各组小鼠肺组织中EMT标志物的变化。

　　6、IL-17A中和抗体作用后，检测不同处理组肺组织T细胞亚群及巨噬细胞的浸润情况。

　　7、检测IL-17A中和抗体作用后不同处理组转录因子NF-kB, Smad3, Stat3及NF-kB-pp65、NF-kB-pp55、P-Smad3及P-Stat3的表达。

　　项目对象

　　小鼠

　　项目时间

　　自2020年9月至2025年9月

　　项目联系人

　　朱少敏 电话：15010624992