项目背景

　　胰腺癌（PC）预后极差，是一种致命的恶性肿瘤。PC肿瘤组织中T细胞浸润少、免疫抑制微环境和低突变负担的特点，使其得到获得性免疫特权，这是胰腺癌致死率极高的一个关键原因。目前常用的癌症治疗方法如手术、化疗、放疗和其他局部区域治疗都未能使得PAC的生存率得到明显改善。使用针对特定肿瘤抗原体外扩增获得的肿瘤浸润淋巴细胞(CAR-T细胞)的过继细胞疗法能够使20-25%的转移性黑色素瘤患者的肿瘤完全消退，或许能为胰腺癌提供新的治疗策略。KRAS致癌基因的突变十分常见，能够促进许多人类癌症的形成和进展。突变的ras蛋白仅特异性地表达于肿瘤组织中，将ras蛋白的突变位置作为构建CAR-T的新抗原具有很高的特异性，不会损伤正常组织。KRAS G12D人类胰腺癌中最常见的KRAS突变体，已在大约45%的胰腺癌和13%的结肠直肠癌中被发现。

　　为了深化肿瘤领域研究开展，提升我国基础科研能力，响应国家不断深入并提升医疗水平的精神。北京医学奖励基金会特设立“靶向KRAS G12D突变的类TCR CAR-T细胞的构建和应用基础研究”项目。

　　项目内容

　　本研究提出了构建针对KRAS G12D突变的胰腺癌的类TCR CAR-T细胞的构建及其对PC的治疗效果评价。具体内容如下：获得突变型KRAS G12D HLA-A*24:02的蛋白；获得针对HPV16 E7 HLA-A*24:02的纳米抗体；KRAS G12D抗原表达质粒构建及验证；纳米抗体慢病毒表达质粒构建及验证；慢病毒包装质粒；突变型KRAS G12D抗原慢病毒载体制备与滴定；突变型KRAS G12D过表达稳转细胞株构建；靶细胞查询与订购；靶细胞抗原检测；生物素标记突变型KRAS G12D ：HLA-A*2402复合物制备；CAR表达的摸索与确定；CAR慢病毒载体制备与滴定；CAR-T细胞扩增与CAR表达差异性分析；突变型KRAS G12D CAR-T细胞分化特性研究；构建突变型KRAS G12D HLA-A*24:02肿瘤的小鼠模型。

　　项目对象

　　人胰腺癌细胞株及动物模型。

　　项目时间

　　自本项目启动之日起至2025年1月30日止

　　项目联系人

　　乔栋梁  联系电话：13811117387