项目背景

　　肺癌是当今世界上最常见的肿瘤。近年来肺癌的发病率明显上升，同时肺癌也是最常见的癌症死亡原因，目前肺癌的 5 年总生存率约为 15%。 大约 80%的肺癌患者因发病时已经局部扩散、远处转移或身体状态不佳而不能手术。放疗或联合化疗是这些患者常用的治疗手段。其中>50%的肺癌患者需要接受放射治疗。肺癌中> 80%为非小细胞肺癌。目前NSCLC患者放射治疗的预后不佳，一系列临床试验表明提高放射治疗剂量能够改善局部控制率，延长无复发生存时间和总生存时间。

　　经研究证实，肿瘤的放疗敏感性主要由以下两方面的因素决定：(1)肿瘤内在的影响放疗敏感性的因素；(2)外在的影响放疗敏感性的因素包括肿瘤微环境如肿瘤的血供等。研究证实乏氧情况下肿瘤放疗抵抗增加。因此，可以基于以上两点进行放疗增敏剂的选择。

　　过去的几十年，光动力治疗(photodynamic therapy，PDT)所取得的进展，在一定程度上与不同类型的光敏剂的发展是同步的。光敏剂在特定波长光照射后受激发，机体组织中产生具有细胞毒性作用的活性氧，诱导肿瘤细胞凋亡或坏死，产生的物质还参与刺激和调节机体的炎症和免疫反应，对控制肿瘤生长具有重要作用。HpD是临床上最常用的光敏剂，国内外已有基础及临床试验研究表明HpD具有一定的放疗增敏作用。目前，有关血卟啉作为放射增敏剂的相关研究较少，尤其是机制，目前不清楚。

　　我们前期的研究显示HpD能够在细胞水平影响非小细胞肺癌细胞系放疗的敏感性，并通过基因芯片结合生信分析，筛选出HSP90AA1作为潜在分子靶点。HSPs在细胞增殖，分化和致癌作用中起重要作用。多项研究表明HSPs与肿瘤的关系密切，之前的报道认为包括HSP27、HSP40及HSP90都参与到肺癌的发生发展过程中。有研究显示，HSP蛋白能够通过阻断Akt/mTOR通路来影响肺癌细胞的生物学行为的改变，这些无疑为我们研究HpD的机制提供了理论基础。

　　基于此，我们提出基于HSP90AA1/Akt/mTOR信号通过多种分子细胞生物学及实验动物学手段对探讨HpD在非小细胞肺癌肺癌放疗增敏中的治疗效应及相关的作用机制进行深入研究，将有助于肺癌领域的研究，增强人们对于肺癌发生发展机制的认识，并有可能确立HpD作为肺癌的放疗的新型增敏剂，为临床肺癌药物治疗提供新的思路。

　　为了响应国家不断深入并提升医疗水平的精神。北京医学奖励基金会特设立“HSP90AA1通过AKT-mTOR通路调控自噬影响肺鳞癌细胞放疗敏感性的机制研究”项目。

　　项目内容

　　1. HpD处理对非小细胞肺癌HSP90AA1及相关通路分子表达的影响

　　非小细胞肺癌分为对照组、放疗组和放疗+HpD，定量PCR和Western blot检测HSP90AA1表达水平，同时检测HSP90下游AKT/mTOR信号通路上关键基因和蛋白的表达水平，明确HpD处理在非小细胞肺癌HSP90AA1及相关通路分子表达的影响。

　　2.体外实验过表达/敲低HSP90AA1后检测HpD对放疗效果的影响

　　构建HSP90AA1过表达及敲低载体转染非小细胞肺癌细胞，定量PCR和Western blot检测HSP90AA1及AKT/mTOR信号通路上关键基因和蛋白的表达水平；流式检测凋亡、周期、CCK检测增殖、Transwell检测迁移侵袭等，明确HSP90AA1在体外参与到HpD对放疗作用效应中。

　　3.体内实验过表达/敲低HSP90AA1后检测HpD对放疗效果的影响

　　建立小鼠移植瘤模型，分为非小细胞肺癌对照组、HSP90AA1过表达组及HSP90AA1敲低组，同时结合单纯放疗及放疗+HpD处理，观察小鼠成瘤能力的变化（包括肿瘤的大小、体积），免疫组化检测HSP90下游AKT/mTOR信号通路上关键基因的蛋白的表达水平，明确HSP90AA1在体内参与到HpD对放疗作用效应中。

　　4.HSP90AA1参与HpD对放疗效应的机制

　　采用上述构建HSP90AA1过表达敲低载体转染非小细胞肺癌细胞，联合AKT/mTOR信号通路激活剂或抑制剂处理，流式检测凋亡、周期、CCK检测增殖、Transwell检测迁移侵袭等，明确HSP90AA1参与HpD对放疗效应的机制。

　　项目对象

　　肺癌细胞、小鼠。

　　项目时间

　　自2022年5月至2025年5月

　　项目联系人

　　肖雨馨 联系电话：18810872779